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    Qiagen 超敏探針RT-PCR試劑盒 分子生物試劑

    • 更新時間:  2023-07-27
    • 產品型號:  208354
    • 簡單描述
    • Qiagen 超敏探針RT-PCR試劑盒
      用于快速的cDNA合成和高度可重復性的兩步法RT-PCR

      gDNA Removal Mix可消除gDNA帶來的誤差
      內質控可指示cDNA合成的質量
      高親和性逆轉錄酶可實現寬線性范圍的cDNA合成
    詳細介紹

    Qiagen 超敏探針RT-PCR試劑盒


    du te的QuantiNova Reverse Transcription Kit提供了含有基因組DNA去除方案和內質控的一種快速便捷的cDNA合成方法。gDNA Removal Mix可有效去除RNA樣本中的基因組DNA污染,同時內質控RNA可以監測逆轉錄和擴增反應是否成功。QuantiNova Reverse Transcription Kit提供了快速高效逆轉錄反應所需的一切。合成的cDNA適用于進行real-time PCR, 可以對任何mRNA區域的靶向序列進行可靠定量。

    Performance

    du te的gDNA Removal Mix可迅速有效去除RNA樣本中的基因組DNA污染。去除基因組DNA污染對于獲得精確基因表達結果非常關鍵,并且在不能設計出RNA特異性的引物時,例如當分析單外顯子基因時,也需要去除基因組DNA污染。使用gDNA Removal Buffer可以節省時間和成本,因為不需要在反應中或反應后單獨進行DNase消化。 

    全新開發的內質控是一種成分明確的轉錄本(RNA分子),可直接加入您的樣本并同時被逆轉錄為cDNA,可直接反應儀器或相應試劑是否正常,實驗構建的體系是否存在錯誤,以及反應體系中是否存在抑制劑。預期的Cq (CT)范圍可以用來確認逆轉錄和PCR擴增的成功與否,以及實驗結果的可重復性。 


    Qiagen 超敏探針RT-PCR試劑盒

    QuantiNova Reverse Transcriptase的高RNA親和性確保您可從任何RNA模板獲得高產率cDNA。即便是難擴增模板,如高GC含量或含有復雜二級結構的模板,也可被成功進行逆轉錄反應。Reverse Transcription Mix包含一種特別優化的oligo-dT和隨機引物混合物,可以從包括5’區域在內的RNA轉錄本的任何位置進行cDNA合成。無論擴增靶標位于轉錄本的哪個位置,該試劑盒均能提供可供real-time PCR分析使用的高產量cDNA。同時對于低表達豐度的基因, 該試劑盒還可提供更高靈敏度的檢測能力。 

    QuantiNova Reverse Transcription Kit可在較寬的起始量范圍內提供精確的結果,在標準的實驗方案中起始RNA量可zui高達5 µg,在特殊要求的實驗條件下該用量可以加倍。 

    Principle

    QuantiNova Reverse Transcriptase具有高RNA親和性,可以在極寬的模板量范圍內(10 pg– 5 μg)合成cDNA(見圖:5 µg–10 pg起始 RNA的精確定量)。無論擴增靶標位于轉錄本的哪個位置,該試劑盒可提供用于real-time PCR分析的高產量cDNA。即使難擴增模板,比如高GC含量或含有復雜二級結構的模板,也可被成功進行逆轉錄反應。QuantiNova RT Buffer經過優化,可兼容real-time PCR緩沖液。

    為獲得精確的real-time RT-PCR基因表達檢測結果,非常重要的一點是保證只有cDNA被擴增和檢測到。gDNA Removal Mix可迅速有效的去除基因組DNA干擾(見圖:有效去除gDNA污染保證準確定量轉錄本)。使用gDNA Removal Mix節省了時間和成本,因為不需要在反應中或反應后單獨進行DNase消化。同時,也無需設計RNA特異性引物或探針。

    檢測cDNA合成的差異度可以顯示實驗結果的可重復性。全新開發的內質控是一種成分明確的轉錄本(RNA分子),可直接加入您的樣本并同時被逆轉錄為cDNA,可直接反應儀器或相應試劑是否正常,實驗構建的體系是否存在錯誤,以及反應體系中是否存在抑制劑。因為內質控和真實轉錄本的性質相似,所以它可以在接下來的qPCR實驗中用來確認逆轉錄和PCR擴增的成功與否(見圖:內質控可靠檢測是否存在抑制劑)。

    QuantiNova Reverse Transcription Kit成分 
    成分優勢
    gDNA Removal Mix確保在real-time RT-PCR中只檢測RNA
    Internal Control RNA確認RT-PCR成功與否
    QuantiNova Reverse TranscriptaseRNA模板量范圍極寬(10 pg – 5 μg RNA)
    高靈敏度
    QuantiNova RT buffer system逆轉錄難擴增模板
    RT Primer Mix從轉錄本任意區域合成cDNA,包括從5’區

    Procedure

    使用QuantiNova Reverse Transcription Kit進行基因組DNA去除和cDNA合成僅需20分鐘。該試劑盒包含進行快速cDNA合成的所需的一切成分。

    純化后的RNA和gDNA Removal Mix簡單孵育即可除去基因組DNA污染。和其它方法不同的是,RNA樣本接下來可直接與Reverse Transcription Mix和Reverse Transcription Enzyme的預混液混合,進行逆轉錄反應。使用QuantiNova Reverse Transcriptase,逆轉錄反應可以在低溫下進行,包括對于復雜的二級結構模板。反應在42°C的溫度條件下進行保證了RNA的完整性,并隨后在85°C進行酶滅活以終止反應。不需要進行額外的RNA變性或RNase H降解。

    Applications

    QuantiNova Reverse Transcription Kit可從任何起始材料(包括激光微切割樣本或組織活檢樣本)獲得高效及高靈敏度real-time RT-PCR結果。

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